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智立中特(武汉)生物科技有限公司
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智立中特生物人卵巢癌细胞OVCA433
智立中特生物人卵巢癌细胞OVCA433
2022年10月25日
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价格:
面议
起批量:
1 件起批
区域:
湖北 武汉 东西湖区
关键词:
智立中特生物 质粒载体网
联系人:
肖** 女士 (经理)
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立即询价
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详细介绍
细胞名称:人卵巢癌细胞OVCA433
产品规格:T25培养瓶x1;1.5ml冻存管x2
细胞数量:1x10^6;1x10^6
保存温度:37℃;-198℃
运输方式:常温保温运输;干冰运输
安全等级:1
用途限制:仅供科研2类
培养体系:DMEM高糖培养基+10%FBS+1%三抗
培养温度:37℃
二氧化碳浓度:5%
简介:人卵巢癌细胞OVCA433取自女性供体,贴壁培养。
一、运输和保存
干冰运输及复苏好存活细胞
(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱**夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
(2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
细胞接收后的处理
1)收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。
3)半贴细胞和贴壁不牢(悬浮)细胞:T25瓶置于37℃培养箱中约2-3h,显微镜下观察细胞的情况,若细胞密度在60%以下,客户需收集T25瓶中的悬浮细胞离心后用**培养基重悬后打回到原培养瓶中继续培养,若细胞生长70%-90%对细胞进行传代,传代时需要收集培养基中悬浮的细胞离心后回收。
4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的。
二.细胞处理:
1)冻存细胞的复苏:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL**培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,**培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml**培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。**天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达70%-90%,即可进行传代培养。
该细胞为悬浮和轻微的贴壁细胞,传代可以参考以下方法:
1.收集:将培养瓶中的悬浮的细胞收集到离心管中。用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。由于细胞贴壁不牢PBS润洗后细胞会脱落所以PBS也要回收到离心管中。
2.加入0.25%(w/v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL)置于37℃培养箱中消化1-2分钟(难消化的细胞可以适当延长消化时间),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。
3.将收集到的悬浮细胞、pbs清洗液中的细胞和消化下来的贴壁细胞以1000rpml离心5min,弃去上清,补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的**培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3)细胞冻存:收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
联系方式
智立中特(武汉)生物科技有限公司
联系人:
肖** 女士 (经理)
电话:
手机:
传真:
邮箱:
1944067858@qq.com
联系地址:
湖北省武汉市东湖高新开发区软件新城健康智谷D2栋5楼
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